化學(xué)發(fā)光凝膠成像伴隨著冷CCD技術(shù)發(fā)展壯大
化學(xué)發(fā)光也就是化學(xué)法剛分析法,分子發(fā)光光譜分析法中的一類,它主要是依據(jù)化學(xué)檢測體系中待測物濃度與體系的化學(xué)發(fā)光強度在一定條件下呈線性定量關(guān)系的原理,利用儀器對體系化學(xué)發(fā)光強度的檢測,而確定待測物含量的一種痕量分析方法?;瘜W(xué)發(fā)光與其它發(fā)光分析的本質(zhì)區(qū)別是體系產(chǎn)生發(fā)光(光輻射)所吸收的能量來源不同。體系產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光,必須具有一個產(chǎn)生可檢信號的光輻射反應(yīng)和一個可一次提供導(dǎo)致發(fā)光現(xiàn)象足夠能量的單獨反應(yīng)步驟的化學(xué)反應(yīng)。
化學(xué)發(fā)光有哪些應(yīng)用
化學(xué)發(fā)光Western雜交檢測,是同位素檢測的一種高度靈敏的替代方法。酶標(biāo)記抗體取代了放射性標(biāo)記抗體,當(dāng)它作用于底物時,可產(chǎn)生光信號。多數(shù)特異抗原檢測方法以辣根過氧化物酶(HRP)或堿性磷酸酶(AP)二級抗體耦聯(lián)物為基礎(chǔ)。信號可通過感光膠片或的成像設(shè)備來采集。化學(xué)發(fā)光底物用于免疫印跡技術(shù)已有十幾年的歷史,目前大部分實驗室做轉(zhuǎn)印時都會采用化學(xué)發(fā)光技術(shù)進行檢測。
隨著冷CCD化學(xué)發(fā)光檢測技術(shù)的發(fā)展,現(xiàn)在越來越多的實驗室都開始采用冷CCD的凝膠成像系統(tǒng)進行化學(xué)發(fā)光的檢測,膠片成像雖然比自然發(fā)光法靈敏度更高,但也有很多缺點:耗時,需要暗房,顯影劑和膠片,膠片較貴且為需持續(xù)購買的消耗品。同時由于膠片的線性范圍較窄,因此用膠片上的條帶(特別是表達(dá)量較低的條帶)進行定量幾乎不可能。冷CCD技術(shù)與X膠片相比具有瞬時影像處理、高靈敏度和高分辨率、動力范圍廣等優(yōu)點,因此能對條帶進行定量。當(dāng)然這項技術(shù)要求底物能產(chǎn)生高強度長持續(xù)時間的信號,以保證信號能被冷CCD的凝膠成像系統(tǒng)捕獲。